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本制品特别适用于从血清、血浆、尿液中分离纯化包括microRNA和其他小RNA（<200nt）在内的总RNA。本制品灵活处理不同起始量的样品，在有效裂解样本的同时，可有效保存RNA的完整性，提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，提取的RNA可用于RT-PCR、Northern Blot和分子克隆等下游实验。

• 预防RNase污染，应注意以下几方面：
  
  • 使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
    
  • 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
    
  • 配制溶液应使用无RNase的水。
    
  • 操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
• 提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
  
• 本制品中含有苯酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
  
• 样品用RNAtiqu游离RNA提取试剂匀浆后，如不即刻加入氯仿，置于-70℃可放置一个月以上。
  
• 保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2～8℃可以保存一周，-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。
  
• 若下游实验对DNA非常敏感，建议用DNase I(不含RNase)(货号：WE0213)对RNA进行处理。

• 取200μL新鲜或者冻存的血清或血浆，加入3倍体积的RNAtiqu游离RNA提取试剂。振荡30秒，充分混匀。
  注意：样本加入RNAtiqu游离RNA提取试剂后，可能会出现沉淀，经过振荡混匀后，沉淀基本消失。若仍有少量沉淀，不影响下游实验，可继续操作。
  
• 将处理后的样品在室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
  
• 向以上溶液中加入氯仿，每使用1mLRNAtiqu游离RNA提取试剂加入0.2mL氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置2～3分钟。
  注意：如不能涡旋混匀，可手动快速颠倒混匀2分钟。
  
• 4℃ 12000rpm离心20分钟，此时样品分成三层：红色有机相，中间层和上层无色水相，RNA主要在水相中，把水相转移到一个新的无RNase的离心管（自备）中。
  
• 在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温放置30分钟。或-20℃沉淀过夜，效果更佳。
  
• 4℃ 12000rpm离心20分钟，弃上清。
  注意：离心前RNA沉淀经常是看不见的，离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。
  
• 加入75%乙醇（用无RNase的水配制）洗涤沉淀。每使用1mL RNAtiqu游离RNA提取试剂加入1mL 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
  
• 4℃ 12000rpm离心3分钟，小心吸弃上清，注意不要吸弃RNA沉淀。
  注意：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。
  
• 室温放置2～3分钟，晾干。加入30～100μL无RNase的水，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。
  注意：沉淀不要过分干燥，以免难于溶解。